（1）新玻璃器皿的清洗步驟：先用自來(lái)水或肥皂水刷洗干凈，放入洗液中過(guò)夜或浸泡幾天，取出用自來(lái)水沖洗8至10次。然后，用蒸餾水洗3次，用去離子水（或三蒸餾水）洗2－3次，烤干、包裝、滅菌。

　?。?）橡皮制品的清洗步驟：一般選用白皮橡皮塞，使用前先用自來(lái)水洗涮干凈，以后用2％NaOH煮20分鐘，用自來(lái)水沖洗5－6次，再用1.3％HCl煮30分鐘，用自來(lái)水沖洗5－6次，用蒸餾水洗3次，zui后用去離子水洗，干后包裝滅菌。

　　ATCC細(xì)胞計(jì)數(shù)一般用血球計(jì)數(shù)板，按白血球計(jì)數(shù)法進(jìn)行計(jì)數(shù)。

　　操作方法如下：

　　1.首先取待稀釋的ATCC細(xì)胞懸液1ml加4ml生理鹽水（或Hank液）作5倍稀釋。

　　2.先將特制的蓋玻片放在血球計(jì)數(shù)板上，使兩側(cè)均現(xiàn)帶色牛頓環(huán)。用血色素吸管（或ATCC細(xì)胞管）取少量待測(cè)ATCC細(xì)胞懸液，沿蓋玻片邊緩緩滴入，讓其自由滲入，待整個(gè)蓋玻片下均充滿(mǎn)ATCC細(xì)胞懸液為宜。注意不要使液體流到旁邊的凹槽中。

　　3.在顯微鏡下，用10′10的倍數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，所用計(jì)數(shù)板如圖2所示。

　　4.計(jì)數(shù)的方法：計(jì)算計(jì)數(shù)板的四角大方格（每個(gè)大方格又分16個(gè)小方格）內(nèi)的ATCC細(xì)胞數(shù)。計(jì)數(shù)時(shí)，只計(jì)數(shù)完整的ATCC細(xì)胞，若聚成一團(tuán)的ATCC細(xì)胞則按一個(gè)ATCC細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。在一個(gè)方格中，如果有ATCC細(xì)胞位于線(xiàn)上，一般計(jì)上線(xiàn)ATCC細(xì)胞不計(jì)下線(xiàn)ATCC細(xì)胞，計(jì)左線(xiàn)ATCC細(xì)胞不計(jì)右線(xiàn)ATCC細(xì)胞，計(jì)數(shù)誤差不能超過(guò)±5％。

　　5.計(jì)數(shù)的換算：計(jì)完數(shù)后，需換算出每毫升懸液中的ATCC細(xì)胞數(shù)。由于計(jì)數(shù)板中的每體積即為0.0001cm2。故可按下式計(jì)算

　　原ATCC細(xì)胞懸液ATCC細(xì)胞數(shù)/ml＝n/4′10000′5（稀釋倍數(shù)）

　　n＝四大格內(nèi)的ATCC細(xì)胞總數(shù)

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